㈠ 请问做PCR跑完电泳后还有哪一些步骤
看你的目的了，要是想知道pcr产物的序列，就是
切胶，回收，连接，转化，挑单克隆摇菌，提质粒，送测序
㈡ 简述PCR技术操作步骤
PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物，在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行，在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物在DNA聚合酶的作用下沿模板延伸，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。
主要的技术步骤是：
（1）DNA变性 加热使靶DNA序列双链解离成单链DNA。
（2）引物与靶DNA退火 适当降低温度，使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。
（3）引物延伸 在DNA聚合酶的催化下，引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后，又可作为模板与引物杂交，并且在DNA聚合酶的催化下，引导合成新的靶DNA链。如此反复进行以上3个步骤，即可使靶DNA片段指数性扩增。
㈢ 如何从pikoreal荧光定量pcr仪导出实验数据
PikoReal设计小巧，反应速度快，灵敏度高。具有绝对定量，相对定量，熔解曲线分析，高分辨率熔解曲线分析，等位基因分析等功能，是一款性能优越，并能成倍节省实验成本的高性价比荧光定量PCR系统。
主要特点
整体式设计，系统稳定可靠-光学检测系统和PCR系统高度整合，几乎没有移动部件。仪器长途运输或长期使用后也不会导致光路系统偏移，无需光路矫正。
PCR系统快速高效-超快的反应速度能成倍节省实验时间。独特的设计能使反应体系小到5 ul，节省试剂，耗材和能源消耗。
控制分析软件功能齐全，直观易用-中文、英文、日文三种软件界面可自由切换，一键点击，分析报告自动生成。
㈣ PCR试验的步骤
标准的PCR过程分为三步（如图所示）：
1.DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，
氢键断裂，形成单链DNA
2.退火（复性）（40℃-65℃）：系统温度降低，引物与
DNA模板结合，形成局部双链。
3.延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活
性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′ 端延
伸，合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。
现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。
㈤ pcr过程是编辑学边复制吗
不是边解旋边复制啊,从解旋到引物结合再到复制,所需温度都不一样,所以是解旋后复制。
PCR技术:通过加热使双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板DNA杂交，在TaqDNA聚合酶，dNTPs，Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物，重复上述过程至25-40个循环，达到体外扩增核酸序列的目的。
㈥ 在做任意引物PCR时，PCR成功之后该怎么做
肯定是先跑个胶，看P出来了些什么片段，有多少种片段，各个片段有多大，有没有想要的片段，回收了去连载体或者去测序
㈦ pcr产物 跑胶及数据处理 问题。
1 不可以啊
2 须除去背景
㈧ PCR技术的操作步骤。
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中兇手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年，PCR已发展到第三代技术。1973 年，台湾科学家钱嘉韵，发现了稳定的Taq DNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。x0dx0aPCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。x0dx0aPCR的原理x0dx0aDNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。x0dx0a但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。x0dx0a耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。x0dx0aPCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。x0dx0a原料:x0dx0aDNA聚合酶链式反应技术简称PCR技术，是一种以模板DNA为基础，在引物和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下，利用DNA聚合酶的酶促反应，完成对模板的目的片段的快速扩增的过程，其依赖于3个温度的反复循环。x0dx0ax0dx0a每一循环的3个步骤为：x0dx0a(1)变性：即双链DNA在94℃条件下，通过热变性使模板的双链DNA氢键断裂而变成单链。x0dx0a(2)复性：即当变性温度突然降至引物Tm值(通常为35～65℃)以下时，使引物与模板DNA互补序列杂交。由于引物一般由10～25个碱基序列，模板DNA结构远比引物分子复杂，且反应体系中引物分子的浓度又远大于模板DNA，故在退火温度时，引物与模板DNA容易结合形成互补链。x0dx0a(3)延伸：在DNA聚合酶的作用下，以DNA为模板和以4种脱氧核糖核苷酸为原料，在Mg2+存在的条件下。DNA聚合酶依赖于其5'→3'的聚合酶活力，以引物结合于DNA模板链为起始点。使引物的序列得以延伸，合成模板DNA的互补链。
㈨ pcr反应完成后如何保存
4°保存不要超过24个小时，在跑完pcr后放置扩增的产物会发生不可知的变化，产生未知的结果，我们老板都是要求我们做完PCR立马跑胶村结果
㈩ 进行PCR实验时应注意哪些事项
首先，要确定你的模板DNA的浓度大概是多少，太稀和太浓都影响PCR结果，具体数据不记得了，只是我自己跑PCR时因为浓度问题失败了很多次，通过多次调整浓度才得到较理想的结果。
其次，如果是自己提的DNA，要确保模板中没有酒精（提DNA最后一步，一定要等酒精挥发完才能加TE）
最重要的是要探索一个好的退火温度，退火温度的高低可以以0.5℃的梯度变化确定，假如参考值为61℃，先跑一次，看结果，如果拖尾很长，则一个一个梯度增加退火温度，但不能增得太急，我那时次增加5℃，结果跑出来全是很小很小的片段，大概都只有300bp了。
这是我跑PCR的一些经验，仅供参考